将BALB/c小鼠分为强直性脊柱炎组(模型对照组)、依那西普组、miR-146a抑制剂组、依那西普+miR-146a抑制剂组,以及miR-146a抑制剂阴性对照组共5组,治疗4周后,检测小鼠血清C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、甲状旁腺素(PTH)、骨保护素(OPG)、骨碱性磷酸酶(BALP)和骨钙素(OC)水平,Western blot检测WFlavopiridol花费nt/β-catenin通路蛋白、OPG/细胞核因子KB受体活化因子配体(RANKL)/细胞核因子KB受体活化因子(RANK)通路蛋白。结果依那西普可以抑制AS活动期患者miR-146a的表达;miR-146a抑制剂可以模拟依那西普作用,明显降低小鼠血清CRP、TNF-α、IL-6、BALP水平,提高血清PTH、OPG、BALP和OC水平;显著上调小鼠脊柱组抑制剂织中Wnt、β-catenin、OPG蛋白表达,而显著下调RANKL、RANK表达,差异具有显著性意义。两者合用后效果更好。结论依那西普可能通过抑制miR-146a表达调节成骨和破骨过程,从而表现出改善炎症反应和骨代谢作用。
决明胰蛋白酶抑制剂(Cassia obtusifolia trypsin inhibitor, CoTI)是植物KunitC188-9供应商z蛋白酶抑制剂家族的一个成员,对胰蛋白酶具有较强的抑制活性。利用同源建模预测CoTI的三维模型,发现其形成了β-三叶草型三维结构,由底部的β-桶与顶部的盖子区域组成。通过氨基酸序列和三维模型比对,发现CoTI含有一个保守的Trp114残基,该残基位于盖子区域,与β-桶的Leu98和Ser137形成氢键,其侧链伸向Barrel,和Val68、Leu98、Phe100等形成疏水作用,推测其在β-三叶草型三维结构的形成与稳定中发挥重要作用。