恶性淋巴瘤大致分为非霍奇金淋巴瘤（Non-Hodgkin’slymphoma, NHL）和霍奇金淋巴瘤（Hodgkin’s lymphoma, HL）两大类型。不同类型患者的预后及生存率亦各有不同。随着各种治疗方法的改进，恶性淋巴瘤的治疗、预后及无病生存率都得到较大提高，但每年仍有大量人群因患恶性淋巴瘤死亡，故继续深入研究恶性淋巴瘤的发病机制及研发各种新的抗肿瘤药物成为亟Selleck待解决的问题及任务。近来研究发现，毛萼乙素（Eriocalyxin B，EriB）是冬凌草甲素的结构类似物，它是从常绿植物疏花毛萼香茶菜（Isodon eriocalyxvar. laxiflora）中纯化得到的一种对映贝壳杉烷类化合物。研究显示，在人急性早幼粒白血病细胞株HL60、人肺腺癌细胞株A549、人胃癌细胞株MKN-28和人结直肠癌细胞购买抑制剂株HCT等肿瘤细胞株中，EriB表现出很强的细胞毒作用，它能够显著抑制肿瘤细胞的增殖，但其确切的作用机制目前尚不明确，在淋巴瘤中的作用机制研究甚少，为此，我们进行了相应的研究，为今后更多更有效的抗肿瘤药物的研究提供一些理论依据。 材料和方法 首先，培养5种淋巴瘤细胞株，用浓度梯度的EriB进行处理，观察其对淋巴瘤细胞增殖抑制作用，然后用接近IC5Selleckchem trans-isomer0浓度的EriB处理相对敏感的Namalwa细胞株，流式细胞术分析细胞周期和凋亡的变化，免疫印迹分析细胞周期、凋亡及信号转导蛋白的含量变化。 结果 EriB显著抑制淋巴瘤细胞增殖；周期相关蛋白P21和P27表达上调，细胞阻滞在G0/G1期；通过上调磷酸化caspase-3、caspase-8和caspase-9表达，诱导淋巴瘤细胞凋亡；减少磷酸化NF-kB和其激活子IkB激酶表达，抑制NF-kB信号转导，诱导细胞凋亡和周期阻滞。

第三章中,我们对一系列Rho激酶抑制剂进行分子对接和3D-QSAR研究。对接研究获得了整个数据集化合物的活性构象,并研究了化合物在质子化与非质子化两种状态下的结合模式。CoMFA和CoMSIA分析研究了影响化合物生物活性的关键结构因素。根据分子对接以及模型的三维等势面图结果发现1-H吲唑化合物优于异喹啉化合物,并提出了对这类抑制剂的修饰方案：(1)P区苯环4位用给电子基取代；(Selleck2)P区用体积较大疏水基团取代。根据分子模拟研究得到的信息,我们设计了一系列预测活性较高1-H吲唑化合物,说明通过适当的取代可以提高这类化合物的活性。 第四章中,应用分子对接、药效团建模和3D-QSAR方法进行一系列EphB4激酶抑制剂的分子模拟研究。分子对接结果表明这类化合物与受体ATP结合口袋形成多个氢键相互作用：A环吡啶-N原子与铰链区Met69selleck6残基形成氢键；脲基的羰基与NH分别与Lys647和Asp758残基形成氢键。药效团模型给出了影响化合物活性的重要药效特征。CoMFA和CoMSIA分析研究了影响化合物生物活性的关键结构因素,模型的三维等势面图能够为这类抑制剂的修饰提供指导。 第五章中,我们对一系列B-RAF激酶V600E突变体的抑制剂进行分子模拟研究。对接研究表明活性最高的代表化合物ABT 26340与受体ATP结合口袋形成四个氢键相互作用：A环吡啶-N原子与铰链区Cys531残基形成氢键；脲基的羰基与NH分别与Asp593和Glu500残基形成氢键。药效团模型给出了影响化合物活性的5个重要药效特征：两个氢键受体、一个氢键给体、一个疏水特征及一个芳环特征。基于公共骨架、分子对接和药效团叠合的CoMFA和CoMSIA分析表明,利用分子对接叠合的构象得到的模型具有最佳的预测能力,模型的三维等势面图能够为这类抑制剂的修饰提供指导。

上述反应得到的不同取代的2-氨基-1,3,4-噻二唑结构与各种长度的脂肪二酸发生缩合,最后转化成异羟肟酸。 合成过程共得到40个新化合物,其中目标化合物22个,新中间体18个均通过核磁共振氢谱、电喷雾质谱或高分辨质谱等方法进行了结构确证。采用HDACs试剂盒对所有目标化合物进行初步活性筛选,结果显示多数噻二唑类异羟肟酸衍生物对HDACs有较好的抑制作用,其中化合物6i、或者6d、6j、6n、6m、6o和6k抑制HDACs的活性与SAHA相当,IC50值均在0.5μM以下。上述结果说明,1,3,4-噻二唑基团与异羟肟酸基团之间有5或6个亚甲基时抑酶活性较高。对于抑酶活性较高的噻二唑类化合物6i、6d、6j和6n又进行了抗肿瘤细胞增殖活性测试,初步研究发现这四个化合物对高表达HDACs的人MDA-MB-231乳腺癌细ZD6474 花费胞系和人K562慢性粒细胞白血病细胞系均具有抗增殖活性。
帕比司他是Novartis公司研制的异羟肟酸类小分子组蛋白去乙酰酶抑制剂,临床上作为罕见病用药,用于皮肤T细胞淋巴瘤的治疗。本文以苯肼和5-氯-2-戊酮为起始原料,经过缩合、分子内成环以及重排反应后得到关键中间体2-甲基色胺。以(E)-4-甲基肉桂酸甲酯为原料,经NBS溴化,得到另一中临床试验间体(E)-4-溴甲基肉桂酸甲酯。然后,2-甲基色胺与(E)-4-溴甲基肉桂酸甲酯发生N-烷基化反应,制得(E)-3-[4-[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙胺基]甲基]苯基]丙烯酸甲酯盐酸盐。最后,(E)-3-[4-[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙胺基]甲基]苯基]丙烯酸甲酯盐酸盐与过量的羟胺溶液发生胺解反应制得目标产物帕比司他,总收率30.6%。该工艺路线原料价廉易得,反应条件温和,有一定的应用价值。

造模后野生型C3H小鼠各种免疫细胞因子表达升高,TLR4缺失抑制了一系列细胞因子如IL-12,TNF-α,IFN-γ等的表达。我们的实验结果还发现TLR4缺失后肝细胞DNA损伤增加,ROS大量堆积。研究证明肝细胞DNA损伤加剧主要是由于参与DNA修复的蛋白Ku70表达的下降。进一步在细胞水平验证了TLR4信号与DNA修复蛋白Ku70表达的相关性,结果发现TLR4信号分子量活化能够调控Ku70的蛋白表达,而封闭细胞表明TLR4受体则可以降低LPS、DEN刺激的Ku70的蛋白表达。我们通过腺病毒在TLR4缺失小鼠体内过表达DNA修复蛋白Ku70,发现Ku70的过表达降低了化学致癌物造成的DNA损伤和ROS堆积,这有可能影响后期肝细胞癌发展进程。DNA损伤应答信号可以参与多种免疫应答反应,而我们的研究第一次将免疫也许受体与DNA损伤修复信号联系起来,可见免疫受体不仅可以作为抵抗外源微生物感染的防线,而且可以介导内源危险因子如DNA损伤事件的信号传导,抵御化学致癌物诱导的DNA损伤和细胞突变,抑制肿瘤发生。
目的： 1.探索microRNA在卵巢癌BRCAness中的作用,证实miR-9参与卵巢癌顺铂耐药。 2.研究Dicerl的表达和卵巢癌预后之间的Sotrastaurin供应商关系,并揭示潜在的机制。 3.研究ROS相关通路和卵巢癌预后之间的关系,并建立ROS相关通路的综合评分,实现对卵巢癌患者预后的判断 材料与方法： 1.通过生物信息学分析,miRNA文库筛选靶向调节BRCA1基因的microRNA。在卵巢癌细胞系中,通过对miR-9和BRCA1的基因干预,证实miR-9可以通过靶向抑制BRCA1,参与卵巢癌BRCAness形成。检测HR通路活性,验证miR-9通过调控HR功能参与顺铂耐药。

虽然近年来骨肉瘤在病因、发生发展、诊断和治疗等方面有了一些进展,但进展十分缓慢,具体发病机制仍然不清楚。其次缺少骨肉瘤诊断和治疗的有效靶标,进一步寻找生物靶标,将具有重要的理论和临床应用价值。同时如能获得骨肉瘤血清诊断标志物,将对骨肉瘤的诊断和治疗带来深远的影响。 microRNA是一种不编码蛋白质的,约21-25nt大小的单链小分子RNA。通过特异性的结合靶基因来调控其表达。从1993年,Metabolism抑制剂第一个microRNA:lin-4被发现后,在过去的几十年,大量的microRNA被发现并认为在细胞的发生、分化、增殖和凋亡起着重要的作用。近期研究表明,microRNA的表达变化与肿瘤的发生、发展、诊断、预后相关。在不同的肿瘤类型中,microRNA呈现两种不一样的角色：抑癌基因和癌基因。主要的作用机制包括：microRNA位点的缺失、扩增、突变,表观遗传水平改变CB-839,转录调控因子的异常表达等。值得关注的是,microRNA具有一个重要特性,即在血浆和血清中非常稳定,不会被RNA酶降解。这使得其实际值与病人身上所得的测试值吻合的很好,如果能在外周血标本中找到特异性表达模式的microRNA生物标记物,对于早期诊断和治疗肿瘤具有重大的意义。 STAT3蛋白是一种重要的转录因子,在生理状态下,STAT3激活快速而短暂,对于正常细胞的PFTα IC50生理功能起着关键性作用。STAT3是EGFR、IL26/JAK、 Src等多个致癌性酪氨酸激酶信号通道汇聚的焦点,在多种肿瘤细胞中均发现有持续性过度激活。STAT3过度激活后诱导细胞增殖、分化、凋亡密切相关的关键基因异常高表达,通过各种途径促进细胞增殖、恶性转化、阻碍细胞凋亡。STAT3激活可上调多种抗调亡基因(c-myc)、细胞周期调节基因(cyclin D1/D2)等,通过诱导转移相关基因MMP、VEGF等表达来促进肿瘤的转移和血管生成。

第二部分Cx43在调节失血性休克大鼠血管低反应性中的作用及机制。1.Cx43在PDGF调节血管反应性中的作用及与PKC和Rho激酶的关系:利用失血性休克大鼠及缺氧血管环,观察MEGJ阻断剂和Cx43AODN对休克血管钙敏感性和反应性的影响;利用血管平滑肌细胞,观察了Rho激酶和PKC的抑制剂在PDGF调节血管反应性中的作用,及Cx43selleck screening libraryAODN在PDGF调节Rho激酶和PKC活性中的作用。2.Cx43在BK调节血管反应性中的作用及机制:利用失血性休克大鼠缺氧处理的血管环,观察MEGJ阻断剂18α-GA对血管反应性的影响,及Rho激酶和PKC抑制剂在Cx43介导BK调节休克血管反应性中的作用及机制。实验结果第一部分Cx43对严重脓毒症血管渗漏MAPK inhibitor的调节作用及机制(一)Cx43在严重脓毒症血管渗漏中的作用Cx43参与了严重脓毒症血管血管渗漏的发生,Cx43表达变化与通透性变化呈正相关,改变Cx43的表达可显著调节血管渗漏。提示Cx43在严重脓毒症血管渗漏中发挥重要的作用。(二)Rho激酶-MLC20在Cx43调节血管渗漏中的作用及机制研究LPS刺激和C通常x43高表达可显著升高白蛋白的透过率和降低TER值,改变内皮细胞应激纤维的形态,使细胞呈现向中心收缩。Rho激酶抑制剂Y-27632可减轻透过率的升高和TER值的降低及抑制细胞向心收缩。LPS刺激和Cx43高表达可显著性升高Rho激酶的表达,Cx43RNAi可降低了Rho激酶的表达。LPS刺激和Cx43高表达可显著升高的MLC20的磷酸化水平,Rho激酶抑制剂可抑制MLC20磷酸化升高。

意义： HDACi的免疫调节效应提供了治疗肝癌的一条新的途径,可能通过上调肝癌细胞表面的NK活化性配体(MICA)的表达,使其容易被表达NKG2D的免疫细胞(NK细胞和部分T细胞)识别,并激活相应的免疫效应,从而发挥机体的免疫监视功能,杀伤肿瘤细胞。本研究在肝癌细胞中发现了,组蛋白去乙酰化酶抑制剂引起的组蛋白乙酰化修饰对相关靶蛋白MICA的调控作用。 通常认为,组蛋白高PS-341临床试验乙酰化(Hyper-acetylation)与转录激活相关,而低乙酰化(Hypo-acetylation)则与转录抑制有关。然而在体外细胞实验中,人们发现HDAC抑制剂作用后有不到10%的基因转录活化,与此同时表达增强和表达降低的基因数几乎是相似的,提示非组蛋白的乙酰化在HDACi的基因表达调控中也起着重要的作用。此外,miRNA表观遗传调控的RO4929097分子重量发现开辟了肿瘤治疗的新领域,然而目前人们对miRNA自身调控机制的认识仍较肤浅。本研究探索了组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA在组蛋白高度乙酰化、染色质疏松、活化基因表达的背景下,通过抑制p-STAT3,产生对miR-17-92抑制的机制。这是在探索HDACi对非蛋白编码基因表达调控的确切机制的有益尝试。 本研究结合酶活性和肿瘤抑制生长活性,筛选了LY294002分子量一系列HDAC活性化合物,针对具有良好抗肿瘤潜力和应用前景的化合物ZYJ-34c,采用多种细胞生物学和分子生物学技术,对其抑制人白血病细胞的作用,阻滞细胞周期和诱导凋亡等细胞生物学效应,进行了分子调控机制探讨。解读了ZYJ-34c引起的组蛋白乙酰化修饰对相关靶蛋白p21WAF1的调控作用。最后,采用构建p21shRNA载体,沉默K562细胞中p21WAF1的表达,证实ZYJ-34c对白血病细胞的周期抑制是p21WAF1介导的。

在此期间乳腺癌改良根治术始终是始终是主要的手术方式,2001~2005年和2006~2010年分别为81.1%和87.3%,保乳术占比逐渐增加,由2001~2005年的3.2%上升至2006-2010年的9.1%。接受新辅助化疗、术前空芯针穿刺活检、免疫组化检测(包括ER、PR及HER-2)均呈上升趋势(P值均<0.05)。包括因筛查入院患者所占比例、接受B超、钼靶、核磁检查及自觉肿块≤1Kinase 抑制剂 Library supplier月就诊患者比例均呈上升趋势(P值<0.05)。结论:2001~2010年,本院收治乳腺癌病例数显著增加,提高早期病例检出率以及规范化应用综合性诊疗措施是改善患者预后的关键。
癌症是一种涉及多因子和多通路的复杂疾病。目前,临床上使用单个抗癌药物进行癌症治疗的方法往往会产生药物抗性和毒副作用。因此,联合用药疗法应运而生并受到了研究人员和临床医生的极大关注,特别是具有因为协同作用的联合用药研发。协同作用联合用药展现出了比单个药物治疗效力相加更强的功效,同时由于联合用药中的药物剂量比单个药物应用时剂量要小,且联合用药会同时作用于多个药物靶点及生物通路,因此会减少毒副作用的产生。高通量测序技术的发展为我们提供了大量测序数据,促进了生物信息学联合用药的研究。因此,我们提出了利用病人全基因组测序数据进行精准联合用药预测的模型PDCP,并建Pifithrinα立了相关应用平台。首先,PDCP分析病人体细胞突变数据及拷贝数变异数据,提取突变位点及突变基因,并筛选其中的药物靶点进行后续分析。然后,在人类基因相互作用网络中计算各药物靶点的重要性,并筛选出对疾病具有重要性的药物靶点进行进一步分析。之后,两两组合步骤二中得到的基因集并结合基因相互作用网络对每对基因对计算其协同作用得分,进行排序并筛选出最具治疗潜力的双靶点协同基因作用对。最后,根据所得的基因对,结合药物基因关系,给出病人个性化联合用药方案。

此外,本研究对前期工作中鉴定出的NID1蛋白扩大样本量进行验证,分析NIDl在卵巢浆液性腺癌中的诊断及临床意义。 结果： (1).本研究回顾性分析了271例明确两级分级的OSC患者的临床病例资料,分为低级别组(n=38,占12.7%)和高级别组(n=233,占87.3%)。低级别组和高级组在肿瘤家族史、术前CA125水平、手术病理分期、有无R428淋巴结转移、术前新辅助化疗、淋巴结切除及术后治疗情况等方面,均无显著差异(P>0.05)。两组中对铂类耐药的患者所占比例比较,无显著差异(P=0.280)。低级别组年龄≤50岁的患者所占比例较高级别组高,差异有统计学意义(P=0.027)。与传统WHO分级相比,低级别组中以高中分化(57.1%)为主,而高级别组中以哪里中低分化(98.6%)为主。全组中位随诊时间为26.9个月(2.4～79.9个月),失访率为4.1%。预后单因素分析显示两级分级系统对全组患者OS有显著影响(P=0.034),对PFS无影响(P=0.225)。多因素分析显示两级分级系统并非为卵巢浆液性癌的独立预后因素。 (2).通过生物信息分析,我们从数据库中挑选Sorafenib了β-catenin和Grb2两个蛋白,采用ELISA技术检测了其在OSC患者及健康女性血浆中的水平。研究发现,P-catenin和Grb2蛋白在OSC患者血浆中的水平显著低于健康体检者(P0.05),仅Grb2蛋白水平在行新辅助化疗的患者中显著高于直接手术者。 (3).本研究采用IHC方法检测了p53、β-catenin和Grb2蛋白在不同卵巢肿瘤组织中的表达,特别是在OSC组织中的表达情况。

目的：观察曲古抑菌素A（TSA）对骨肉瘤细胞株143B增殖及凋亡的作用，并探讨其机制。 方法：TSA与p38抑制剂（SB203580,3μmol/L）及JNK抑制剂（SP600125,0.5μmol/L）单独或同时处理143B细胞，以MTT检测TSA作用143B细胞后的增殖变化；台盼蓝染色法检测TSA作用143B细胞后的存活率改变；流式细胞术和JC-1（测定线已经粒体跨膜电位）法检测TSA对143B细胞凋亡的影响；流式细胞术检测TSA对143B细胞周期的作用。同时应用RT-PCR检测Bax、Bcl-2表达，Western blot检测p38/JNK表达。 结果：TSA能够抑制143B细胞增殖，MTT结果显示TSA可以时间和剂量依赖方式抑制143B细胞的增殖能力（P<0.05），台盼蓝染色法结果www.selleckchem.cn/products/BAY-73-4506.html显示TSA可以剂量依赖方式降低143B细胞的存活率（P
目的 研究曲古菌素A（TSA）与aPKC_ι（非典型蛋白激酶C-iota）的相互作用及对胆管癌细胞的影响。 方法 本实验在细胞层面探讨TSA作用于胆管癌细胞系QBC939，从而对胆管癌细胞的凋亡产生的影响，应用流式细胞技术检测TSA在不同的时间及浓度梯度时胆管癌细胞的凋亡率的变获悉更多化，同时应用Real time-PCR技术检测aPKC_ι在相应浓度及时间梯度下的表达变化。 结果 成功建立TSA诱导胆管癌细胞凋亡模型，在流式细胞分析技术下，胆管癌细胞QBC939凋亡率随着TSA药物浓度的增加凋亡率明显增加，随着TSA作用时间的增加凋亡率同样明显增加，同时Real time PCR检测aPKC_ι的表达量与TSA作用时间及药物浓度呈反比.。TSA作用时间越长，药物浓度越高，aPKC_ι表达量越低。