miRNAs通过下调致癌基因或者抑癌基因mRNA水平发挥抑癌或者致癌的生物学作用。许多良恶性肿瘤中已相继发现miRNAs的基因位点及其表达模式,因此探索不同miRNAs的生物学功能具有重要的意义。 miRNAs在肿瘤的侵袭和转移过程中也发挥了重要的作用。例如,miR-155参与TGF-β介导上皮间质转化(epithelial-mesenc因为hymal transition, EMT)以及肿瘤细胞的侵袭和迁移。MiR-21已于多种肿瘤中被证实可以增加侵袭和转移的程度,包括乳腺癌,结肠癌,以及胶质瘤。TWIST1作为转录因子可以激活miR-10b,而后者又参与了TWIST1介导的上皮间质转化过程。肿瘤的侵袭和转移是判断肿瘤预后的主要病理指标,而miRNselleck化学药品As可以作为新的判断预后指标以及为临床治疗提供新的作用靶点,因此研究不同miRNAs在肿瘤发生进展中的特定作用十分重要。 研究目的：miRNAs作为内源性非编码小RNA,在肿瘤的发生进展中发挥着重要的作用。在肿瘤细胞中多数miRNAs表达降低,功能受到抑制,提示其可能起到抑制肿瘤作用。然而,miRNAs抑制肿瘤的很少具体机制尚不明确。我们的实验目的在于研究miR-34b在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中的作用以及作用机制。我们的研究发现肿瘤组织中相比邻近癌旁组织,miR-34b出现明显下降。体外功能实验证实miR-34b促进凋亡,抑制细胞增殖,从而发挥抑制肿瘤的作用。另外,我们还检测了miR-34b与靶标蛋白c-Met以及HGF/Met信号通路的相关性。

本文在全面掌握目前处于临床试验阶段的HDAC抑制剂及其结构特征的基础上,选取了活性最强的LBH589作为先导化合物。然后,采用直接药物设计手段开展目标化合物的设计研究。本文构建了受体HDAC1的同源模型,通过研究配体LBH589与HDAC蛋白活性位点的相互作用关系,进一步合理设计出新型HDAC抑制剂。其次,应用现代合成手段进行相关目标化合物的合成研究。最后,根据文献报道方法对所合成的目标获悉更多化合物进行体外生物活性研究。 结果：本文开创了1条全新的合成路线,共设计合成了18个目标化合物,相关中间体及所有目标化合物均经过1H-NMR、13CNMR、MS或HRMS等手段进行了结构确证。pan-HDAC酶活性抑制实验的初筛结果显示,所有目标化合物在2μM时,均表现出一定的酶抑制率。针对酶抑制率较高的几个目标化合物,进一步测试了其对pan-HDAC的IC50OSI744。其中,化合物3b-6、3c-3和3c-6的IC50均在1μM以下,分别为0.50、0.78和0.36μM。 结论：1)以LBH589为先导化合物所设计的三个系列的目标化合物均具有一定的活性；2)系列二和系列三化合物的活性要高于系列一化合物；3)在系列二和系列三化合物中,R1为芳香环取代基的化合物其活性要高于R1为脂肪烃的化合物；4)化合物3c-6与NFY-27SRT17200(pan-HDAC IC50=0.22μM)的活性接近,为NFY-270提供了候选化合物；5)本研究对相关抑制剂与HDAC1相互作用的认识,为后续研究提供了有效的参考信息。
[研究背景] 食管癌是常见的恶性肿瘤,以其高发病率和不良预后严重威胁着人类身体健康。在我国,食管癌的发病率逐年升高,死亡率仅次于胃癌,不仅危害人类健康也给患者家庭和社会造成沉重的医疗负担。放射治疗作为肿瘤治疗的三大主要手段之一,可以明显缓解患者的症状,改善患者生命质量。

近年针对神经胶质瘤的分子靶标研制、开发了靶向治疗药物，临床试验有一定的治疗效果，但远未达到预期结果。此外，尽管科学工作者对肿瘤侵袭性生长的机制进行了大量研究，仍然不能深入了解脑胶质瘤浸润性生长的机制，因此深入研究其机制，寻找到其有效治疗的途径，是治疗神经胶质瘤、提高患者生存质量的关键。 肿瘤转移是恶性肿瘤的生物学特点，细胞运动能力增强导致其迁移和侵袭，3-MA数据表细胞骨架的重塑是直接原因，而Ezrin是肌动蛋白与细胞膜及膜表面受体连接的桥梁，参与多种肌动蛋白的功能如细胞粘附，细胞运动和形态发生。在多种肿瘤组织表达上调，包括脑胶质瘤。但Ezrin在胶质瘤浸润性生长中的作用不清楚。 结合脑胶质瘤的生物学特性、治疗现状和Ezrin基因在肿瘤迁移和侵袭中的作用，本文研究了Ezrin与胶质瘤细胞时间U251和U87浸润性生长的相关性，并对其机制进行了探讨，主要研究结果： 1、成功构建Ezrin基因的shRNA表达载体，以脂质体Lipofectimine2000介导转染U87细胞，RT-PCR和Western blot检测结果表明，shRNA-Ezrin-2可沉默Ezrin表达，使其mRNA和蛋白表达量降低，确定为有效shDoxorubicin分子量RNA载体。 2、成功构建Ezrin基因表达载体pEGFP-C1/Ezrin。Western blot检测重组载体pEGFP-C1/Ezrin转染组Ezrin表达量高于空载体pEGFP-C1转染组和空白对照组。 3、shRNA-Ezrin-2与过表达载体pEGFP-C1/Ezrin分别转染U251和U87细胞，划痕试验结果显示Ezrin shRNA可阻断U251和U87细胞迁移，其过表达可促进细胞迁移。

1999年之前,普遍的观点认为异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, allo-HSCT)是CML最佳的治疗手段,尤其是近10年来,由于减低剂量预处理或者小清髓移植的改进和进展,及抗真菌剂抗病毒新药的出现,使移植及感染相关病死率也明显下降,通常研究报道低危CML患者5年存活率可达到84.2%,截止目前大部分学者仍认为allo-HSCT是唯一可以治愈CML的治疗方案。伊马替尼(Imatinib, IM)是一种分子靶向药物酪氨酸激酶抑制剂,2006年伊马替尼与干扰素国际随机临床研究(IRIS)报道IM治疗新诊断慢性期(chronic phasAlisertib体内e,CP) CML患者的12个月内完全血液学缓解率、完全细胞遗传学缓解率、主要细胞遗传学缓解率分别为96%、69%和85%,仅有7%的患者进展到加速期(accelerated-phase, AP)或急变期(blast crisis,BC),5年无事件生存率(event free survival, Proteasome 抑制剂EFS)和总生存率(overall survival, OS)分别为83%和89%,国外其他临床实验及国内研究均提示伊马替尼有较好的血液学缓解率及遗传学缓解率。这些临床数据及较好的临床疗效使IM迅速成为CML-CP初治的一线方案。虽然IM对CML有显著的疗效,但也存在问题,一方面它始终无法根除白血病干细胞,且目前仍无大宗病例报道表明可以停药。另一方面部分患者产生原发性或继发性耐药。

2 Aurora-B蛋白在Ⅲ-Ⅳ期卵巢癌组织中的阳性表达率(62.50%,20/32)明显高于Ⅰ-Ⅱ期(20.00%,2/10),(x2=3.945,P=0.047)；淋巴结转移组中阳性率(66.67%,18/27)高于无转移组(26.67%,4可能/15),(z2=6.185,P=0.013)；腹水组阳性率(64.29%,18/28)高于无腹水组(28.57%,4/14),(z2=4.773,P=0.029),差异均有统计学意义；而不同组织学分级分组中表达差异无统GDC-0941浓度计学意义(高分化33.33%,3/9；中低分化57.58%,19/33),P>0.05。 3 Survivin蛋白在恶性组中高表达,主要定位于胞浆,胞核偶有表达。恶性组(85.71%,36/42)、良性组(38.89%,哪里14/36)、正常组(11.11%,2/18)中Survivin蛋白表达差异有统计学意义(x2=33.662,P=0.000),其中恶性组表达高于良性组(x2=18.471,P=0.000)和正常组(x2=30.198,P=0.000),良性组和正常组表达无显著差异(P=0.035>0.017)。

目的通过PLGANPs装载ALA，增强PDT对人皮肤鳞癌A431细胞的体外抑制作用。包括⑴建立ALA的微量测定方法。⑵制备ALAPLGANPs并对其进行表征。⑶评价ALAPLGANPs PDT对人皮肤鳞癌A431细胞的体外抑制作用。 方法⑴ALA的检测：采用荧光胺柱前衍生化HPLC-荧光法对ALA进行检测，以荧光胺作为荧光衍生化试剂，使用C18柱，以乙腈-0.1%三氟乙酸溶液（或者30︰70）为流动相，激发波长和发射波长为398nm和480nm。⑵ALAPLGANPs的制备和 表征：采用超声-复乳法制备ALA PLGANPs。超声功率：120w；超声时间：初乳40s，复乳40s；ALA浓度（w/v）：2.02%，内水相（PBS（pH5））体积：0.52ml；PLGA浓度（w/v）：7.5%，并以30%甘露醇为支架剂进行冷冻干燥。Idelalisib购买采用激光粒度分析仪测定纳米粒粒径，荧光胺衍生化HPLC-荧光法检测ALAPLGANPs的包封率、载药量、缓释。扫描电镜观察ALAPLGANPs形态，红外光谱仪测定结构，差示扫描量热仪测定物相。⑶ALAPLGANPs PDT抑制鳞癌A431细胞体外增殖：鳞癌A431细胞与含有2.7mg/ml ALA PLGA NPs (相当于0.1mMALA)无血清培养Dinaciclib体外基、以及含有0.1mM ALA无血清培养基分别避光孵育4h后采用透射电镜进行细胞形态学研究。接着，鳞癌A431细胞分别与含有2.7mg/ml ALA PLGA NPs、2.7mg/mlPLGA NPs以及0mM（空白对照），0.1mM，1mM，5mM，10mM ALA的无血清培养基避光条件下共孵育，于孵育1h，2h，3h，4h，5h，6h，8h，12h，14h，16h，18h，20h，22h，24h后，测定生成的原卟啉IX荧光强度。

利用脑转移模型我们发现,ABCBl和ABCG2显著抑制了威罗菲尼对脑转移黑色素瘤的治疗作用,而依克利达可以一定程度地提高威罗菲尼的疗效。另外我们还发现一个有趣的现象：在开始用药的时候,基因敲除鼠颅内肿瘤对药物反应比较敏感,肿瘤体积不再增大。但是用药一周或两周之后,肿瘤不再对威罗菲尼有反应,肿瘤迅速增长。我们试图去探讨该肿瘤在如此短的时间内获得耐药性的机制。Alectinib体内但很不幸的是我们利用免疫组织化学、Western和PCR等多种方法检测相关信号通路,均未明确找出该耐药性的产生机制。本实验研究表明ABCBl和ABCG2明显的限制了威罗菲尼对黑色素瘤脑转移瘤的治疗效果,联合应用其抑制剂依克利达可以增强其疗效,但仍不足以完全逆转该限制作用。
背景：乳腺癌是全球范围内的高发性癌症,在治疗时多药耐药是一般对化疗药物疗效及病人康复的一大障碍,而目前多药耐药的机制仍不清楚。研究表明,乳腺癌耐药蛋白BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein,BCRP)在乳腺癌组织中差异表达,是产生获得性耐药的重要原因。甲基化模式的改变有可能是导致其耐药的机制之一,并且在对耐药细胞株的研究中发现,多聚(ADP-P450抑制剂核糖)聚合酶-1[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP-1]的表达也影响着细胞药物耐受的表型,且发现PARP-1能作用于DNMT1的启动子区,影响其甲基化水平,从而调控DNMT1的功能。因此,本研究采用盐酸米托蒽醌(Mitoxantrone,MIT)诱导乳腺癌细胞MCF-7,从而建立耐药程度不同的耐药细胞系,并以耐药细胞系为模型,检测全基因组的甲基化情况、甲基化结合蛋白的表达变化。

由于滋养层细胞—人胃肌成纤维细胞(gsemfs)的获取最为便利,因此我们确立了重编程最优的体系是bbrs+gsemfs,在这样的体系中重编程的效率为~5%。我们也发现能够实现重编程的最少小分子组合是sb431542。此外,我们还证实了hiendopcs来源于ncam阳性的hgecs,实现了起始细胞的精确定位。二、诱导内胚层FK228溶解度祖细胞的表型鉴定及分化潜能研究我们首先检测了常见的内胚层祖细胞特征性的转录因子foxa2、sox9、hnf1b、pdx1、gata4,其他干/祖细胞特征性蛋白包括cxcr4、epcam、lgr5、ck19以及胃上皮特异性的标志muc6、gastrin等在hiendopcs中的表达情况,发现与hge寻找更多cs相比内胚层标志性的基因在hiendopcs中明显上调,而胃特异性的基因则不表达,初步证实了hgecs向内胚层祖细胞重编程的成功。表观遗传分析也显示重编程后细胞发生了显著改变,具备了内胚层祖细胞的分子特征。对hiendopcs的发育阶段进行精确定位,深度测序的结果显示hiendopcs处于hesLY294002半抑制浓度cs来源的原始消化管(pgt)和前肠后段(pfg)这两个内胚层发育阶段之间,且更接近pfg。此外,hiendopcs具有干细胞微观水平的特征并能进行4-6次的传代扩增。由于发育过程中内胚层祖细胞具有向胰腺、肝脏、肠、肺和甲状腺等内胚层器官进行分化的潜能,因此我们使用相应的诱导分化条件发现hiendopcs同样具有形成功能性胰腺β细胞、肝细胞、肠道细胞、肺细胞和甲状腺细胞的能力。

已知,VEGFR2(又称Flk1/KDR)是VEGF促有丝分裂、促血管生成的主要调节因子,参与VM形成。TWIST1上调VE-cadherin和VEGFR2表达,促进肝癌VM发生。以上提示MACC1可能通过EMT相关信号通路,即”TWIST1/2-VE-cadherin/VEGFR2″促进肿瘤细胞表达内皮细胞相关标志物,最终形成VM。在本研究中,我们首次探讨Mselleck中国ACC1是否与GC的VM形成相关,利用88例GC患者临床病理资料,分析MACC1与VM共表达对GC患者预后的影响。同时,我们利用GC动物模型和GC细胞株,验证MACC1在VM形成中的作用,证明” HGF/c-Met-MACC 1-TWIST1/2-VE-cadherin/VEGFR2″信号通路是MACC1促进GC VM形成的具体机制。点击此处第一部分胃癌中存在VM,其与MACC1共表达预示胃癌患者不良预后[目的]观察VM是否存在及其与临床预后的关系；探讨MACC1表达与VM之间的关系,及二者同时表达对临床预后的影响。[方法]收集88例由南方医科大学南方医院2005.1-2010.12间经姑息性手术切除,且随访资料齐全并经病理诊断为胃癌(Ⅳ期)的手术标本,并对临床病例资料和还有随访资料进行整理分析(随访患者总生存时间：是指接受手术治疗日起至任何原因死亡之间的时间,截至分析之日尚存活或未发生病情进展的患者将以他们最后一次取得联系的日期作为截止时间)；利用HE染色和CD31/PAS双染法观察88例GC组织中是否存在VM,并计数PAS/VM密度；利用透射电镜观察VM的超微结构：以免疫组织化学方法检测VM不同密度组中MACC1蛋白表达,分析二者之间的相关性及其与临床预后的关系,进行统计学分析。

方法：选择2010年1月至2012年9月间经我院内科收治的MBC患者,共342例,全部患者均使用含卡培他滨的化疗方案治疗,完整收集其人口学及临床资料以及治疗相关数据。我们针对文献已报道的有关卡培他滨代谢途径的关键基因,在国际人类基因组单体型图计划提供的单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism, SNP)公共数据库(selleck screening libraryhttp://hapmap.ncbi.nlm.nih.gov/)以及千人基因组计划数据库中,检索侯选基因及邻近序列,选取有关汉族人群的SNP位点,结合最小等位基因频率(minor allele frequence, MAF)以及哈迪-温伯格平衡(Hardy-Weinberg Equilibrium, HWE)得出最佳的标签SDNA Damage抑制剂NP(tagging single nucleotide polymorphism,tagSNP)位点。选取要求包括MAF>0.05且HWE>0.1。最终入选4个候选基因的26个位点,对所有患者进行基因分型,然后同卡培他滨治疗后的无疾病进展时间、转移后总生存时间、各项不良反应等进行关联性分析,获得与卡培他滨治疗MBC疗效或毒哪里性相关的分子标记物。 结果：全组患者均为女性,共342例,全部为MBC患者,中位年龄5I岁(26～81岁),中位随访期为27.5月。全部患者均接受含卡培他滨化疗方案治疗。治疗相关不良反应有：白细胞下降(141例/41.2%)、中性粒细胞下降(109例/31.8%)、转氨酶升高(101例/29.5%)、手足综合征(193例/56.4%)、胃肠道反应(204例/59.6%)、胆红素升高(72例/21.1%)。