44%，1μM迁移率为50.02%，3μM为25.97%，5μM为12.99%；明胶酶谱实验中观察到与对照组相比，经过ADS-I作用后，3、5μM的ADS-I处理24小时后U87细胞所分泌的MMP-2明显降低，分别下降至73.22%和61.53%，而1μM ADS-I处理24小时后对U87分泌的MMP-2活性的抑制作用不明显。在细胞免疫化学中，显示经过DAB显色实验及显色程度对比，得出对照组与低剂量组染色呈深棕黄色（+++），3、5μM的ADS-I处理24小时后的细胞分别呈棕黄色（++）和浅棕黄色（+），且IOD值随着药物浓度的增大而值越低，表明此蛋白的阳性率也随之降低，可以说明ADS-I作用于人脑胶质瘤U87细胞内MMP-2活性明显降低，随着药物浓度的增加，抑制U87细胞内MMP-2的作用越强。结论：一定浓度的ADS-I可体外抑制人脑胶质瘤U87细胞迁移和侵袭能力，其机制可能与ADS-I降低细胞基底金属酶的活性相关。
目的：建立关节炎大鼠成纤维细胞和单核细胞共培养模型并诱生破骨样细胞,在此基础上,根据前期临床与实验工作基础,对清络通痹颗粒(QLT)抑制破骨细胞分化成熟的分子机制进行深入探讨。

方法：佐剂性关节炎大鼠造模,提取分离滑膜成纤维细胞和单核细胞,并使用悬挂式小室及六孔板作为共培养材料,将以上两种细胞进行共培养,成纤维细胞置于上层小室内,单核细胞置于下层六孔板内,进行物质交换以此模拟类风湿关节炎病理过程,成功诱生出破骨样细胞,经鉴定为抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色阳性的多核细胞,证实本实验共培养体系可成功诱导出破骨样细胞,其具有骨吸收功能；制备QLT含药血清,共设六组,每组设3个复孔(重复3次以上),分别于共培养第3-5d和第18-21d加入共培养体系,48h后Western blot法观察其对各组破骨细胞TRAF6、ERK1/2、p38、JNK通路表达的影响,免疫荧光法观察其对各组NFATcl表达的影响；为进一步观察QLT对破骨细胞内其他信号通路是否也发挥调控作用,在加入QLT中剂量含药血清基础上,加入MAPK通路抑制剂,免疫荧光法观察各组之间NFATcl表达的差异。 Duvelisib 结果：QLT14.4,7.2,3.6g. kg-1给药的大鼠含药血清可不同程度降低分化前及分化后阶段破骨细胞TRAF6、MAPK通路和NFATcl表达,以高剂量抑制作用显著(P0.05)。

INCB018424 结论：QLT含药血清对TRAF6、ERK1/2、p38、JNK信号通路、NFATcl表达均有抑制作用,并可能对影响破骨细胞分化成熟的其他信号通路也发挥调控作用。
目的： 阿尔茨海默病(Alzheimer’disease, AD),是一种多因素引起的进行性致死性神经系统退行性疾病,临床表现为认知和记忆能力不断恶化,日常生活能力进行性减退,并有各种神经精神症状和行为障碍。老年斑(SPs)和神经元纤维缠结(NFTs)被认为是AD关键的病理特征。目前多数学者认为p-淀粉样蛋白(p-amyloid, Aβ)沉积成为AD发病过程中的重要因素,具有关键作用,是各种原因诱发AD的共同通路。Ap具有神经毒性,当前应用Aβ25-35片段诱导PC12细胞损伤建立AD细胞模型已被广泛用于体外研究实验。淫羊藿苷(icaritin, ICA)为小檗科淫羊属植物淫羊藿的主要活性成分,具多重药理学作用,近年来淫羊藿苷在中枢神经系统的药理作用及其机制研究日益增多,具有抗痴呆抗衰老、抗抑郁、改善缺血性脑损伤等作用。cAMP反应序列结合蛋白(CREB)是一种重要的核转录因子,调节启动子中具有环磷酸腺苷反应单元(CRE)的基因转录,在神经元再生、突触形成及学习记忆等方面具有重要的调节作用。脑源性神经生长因子(Brain-derived neurotrophic factor, BDNF)是神经营养因子(NT)家族的重要成员,对外周和中枢神经具有保护作用,不但能促进神经元生存、生长、分化,而且在调节突触传递和突触可塑性方面发挥重要作用。体外实验发现,给予神经元亚毒性剂量的Ap1-42, CREB信号转导通路受阻,BDNF含量下降,进一步导致突触功能障碍和神经元变性。本研究以Aβ25-35诱导损伤PC12细胞为AD细胞模型,探讨ICA对其CREB及BDNF表达的影响。

方法： 1、细胞培养：PC12细胞培养于含10%胎牛血清和含100U/ml青霉素及100U/ml链霉素的高糖DMEM培养基中,置于37℃、含5%C02的培养箱中培养,2天换液一次,药物干预及各项指标检测均取对数生长期的细胞。 2、MTT比色法：实验分control组、Ap组、ICA组、LY组、LY+ICA组。除control组外,余下四组Ap的浓度均为20μmol/L;ICA组：先加ICA孵育1小时后再加Ap,ICA浓度为20μmol/L;LY组的LY294002浓度为50μmol/L；LY+ICA组为先加LY294002浓度为50μmol/L孵育1h,再加ICA和Ap使其浓度为20pmol/L。 3.Western blot检测：实验分组同(2),测定各组p-CREB (Ser133)/CREB、BDNF、p-Akt(Ser473)/Akt的蛋白表达。 结果： 1、与control组比较,Aβ25-35处理使PC12细胞存活率明显降低,差异有显著性(P<0.01)；与Ap组比较,ICA预处理能提高PC12细胞存活率,差异有显著性(P<0.01)；与ICA组比较,ICA+LY组PC12细胞存活率下降,差异有统计学意义(P<0.05)；与Ap组相比,ICA组能够明显增加模型细胞中P-CREB、BDNF、P、Akt蛋白的表达,差异有统计学意义(P
目的：本实验通过研究加味通腑汤对溃疡性结肠炎大鼠模型的结肠组织上皮细胞凋亡及调控基因Bcl-2、Bax蛋白表达的影响，以观察和探讨加味通腑汤对溃疡性结肠炎的治疗效果，并希望能够为中医药治疗溃疡性结肠炎提供一份充分的实验依据。 OTX015分子量 材料与方法：将清洁级SD大鼠70只，用完全随机分组的方法分为空白对照组、模型组、补脾益肠丸组、柳氮磺吡啶组、加味通腑汤低剂量组（3.25g/kg）、加味通腑汤中剂量组（6.5g/kg）、加味通腑汤高剂量组（13g/kg）。用5%的TNBS原液与无水乙醇按1:1的体积比配备成20mg/kg的配比液以建立溃疡性结肠炎大鼠模型。从造模第4天开始，正常组和模型组用生理盐水灌胃，其他组分别给予补脾益肠丸，柳氮磺吡啶，加味通腑汤高剂量、加味通腑汤中剂量、加味通腑汤低剂量处理，均连续灌胃21天后处死。运用TUNEL染色法检测溃疡性结肠炎大鼠模型结肠上皮细胞凋亡和用SABC法检测凋亡调控基因Bcl-2、 Bax蛋白的表达。 结果：通过统计学分析，模型组与空白对照组比较，AI值明显升高，Bcl-2蛋白表达明显升高，Bax蛋白表达明显升高，差异有显著意义(P<0.